北虫草菌种提纯
1.菌种提纯
(1)消毒。将优良母种和已消毒的斜面培養基试管放入超净工作台内。先用肥皂洗净双手,再用75%酒精棉球擦手和菌种管表面,在酒精灯火焰上灼烧消毒。
(2)转管。转管时两手从接种孔伸入超净工作台内,75%酒精棉球擦拭接种环。左手持菌种管和斜面管,两支试管口对齐于火焰上方。右手持接种环,并将其在酒精灯火焰上干热灭菌,用小指及无名指拔掉棉塞,使棉塞底部朝外。接种环冷却后伸入菌种管内取黄豆粒大并带有薄薄培养基的菌丝块,迅速移入斜面培养基的中部,菌丝朝上。然后,将棉塞在火焰上烧一下,立即塞入试管口,旋紧棉塞。
接种环不要触碰管口及管壁,以防感染。适温培养5~10天左右即可。
2..出草实验
将提纯菌种,在无菌条件下接种到培养基上,在培养室培养。在温度为18~22℃,湿度适宜的条件下培养20~30天,即可形成橙红色子实体。经鉴定,选优良菌种进行生产。
3.菌种复壮
菌种繁殖应无性繁殖与有性繁殖交替进行,否则菌种性状易退化,其表现为出草不整齐、畸形,甚至不出草。因此,在生产过程中应及时对菌种进行有性繁殖来提纯复壮。
(1)消毒。选取高产、优质、早熟的蛹虫草子实体消毒。
(2)接种。将消毒的子实体悬挂于装有PDA培养基的无菌三角瓶内。
(3)培养。接种的三角瓶在25℃左右条件下,在无菌室静置培养一天,当三角瓶的培养基表面出现大量蛹虫草的白色菌丝时,在超净工作台上挑取单个或多个菌丝,用接种环接种到试管斜面培养基中部进行培养。当蛹虫草菌丝布满斜面后再提纯。获得的母种经出草试验后,选择优质蛹虫草子实体再进行组织分离法培养,获取的母种可以扩繁栽培种。
(1)消毒。将优良母种和已消毒的斜面培養基试管放入超净工作台内。先用肥皂洗净双手,再用75%酒精棉球擦手和菌种管表面,在酒精灯火焰上灼烧消毒。
(2)转管。转管时两手从接种孔伸入超净工作台内,75%酒精棉球擦拭接种环。左手持菌种管和斜面管,两支试管口对齐于火焰上方。右手持接种环,并将其在酒精灯火焰上干热灭菌,用小指及无名指拔掉棉塞,使棉塞底部朝外。接种环冷却后伸入菌种管内取黄豆粒大并带有薄薄培养基的菌丝块,迅速移入斜面培养基的中部,菌丝朝上。然后,将棉塞在火焰上烧一下,立即塞入试管口,旋紧棉塞。
接种环不要触碰管口及管壁,以防感染。适温培养5~10天左右即可。
2..出草实验
将提纯菌种,在无菌条件下接种到培养基上,在培养室培养。在温度为18~22℃,湿度适宜的条件下培养20~30天,即可形成橙红色子实体。经鉴定,选优良菌种进行生产。
3.菌种复壮
菌种繁殖应无性繁殖与有性繁殖交替进行,否则菌种性状易退化,其表现为出草不整齐、畸形,甚至不出草。因此,在生产过程中应及时对菌种进行有性繁殖来提纯复壮。
(1)消毒。选取高产、优质、早熟的蛹虫草子实体消毒。
(2)接种。将消毒的子实体悬挂于装有PDA培养基的无菌三角瓶内。
(3)培养。接种的三角瓶在25℃左右条件下,在无菌室静置培养一天,当三角瓶的培养基表面出现大量蛹虫草的白色菌丝时,在超净工作台上挑取单个或多个菌丝,用接种环接种到试管斜面培养基中部进行培养。当蛹虫草菌丝布满斜面后再提纯。获得的母种经出草试验后,选择优质蛹虫草子实体再进行组织分离法培养,获取的母种可以扩繁栽培种。